上班接待時間：周一到周五
早上9:00-11:30 下午13：00--17：00
聯(lián)系電話：021-58582937
手 機：13761218727（同微信）
|
|
|
|
| 鑒定知識 |
當(dāng)前位置：首頁 >> 鑒定知識 |
| Y染色體微缺失分子檢測指南 |
前言
在****發(fā)生障礙引起的男性不育患者中，Y染色體微缺失的發(fā)生率僅次于Klinefelter’s syndrome(克氏綜合征)，是居于第二位的遺傳因素。Y染色體微缺失已成為男性不育患者的常規(guī)檢查項目。歐洲男科學(xué)協(xié)會和歐洲分子遺傳實驗質(zhì)控協(xié)作網(wǎng)為提高診斷質(zhì)量，在1999年和2004年先后發(fā)布了第一版和第二版Y染色體微缺失分子檢測指南。經(jīng)過多年的臨床實踐證明該指南準(zhǔn)確、靈敏和易于操作。2005年4月在上海召開了中國人Y染色體微缺失分子診斷的研討會，會議在歐洲指南的基礎(chǔ)上起草了符合目前我國男性不育診療現(xiàn)狀，并反應(yīng)最新生物技術(shù)發(fā)展的中國人Y染色體微缺失分子檢測指南。
實驗指南
Y染色體上存在影響****發(fā)生的無****因子（AZF）區(qū)域，進(jìn)一步可分為AZFa,AZFb和AZFc三個區(qū)域。Y染色體微缺失分子檢測實驗利用多重聚合酶鏈反應(yīng)（multiplex－PCR）特異性擴增Y染色體AZF區(qū)域的序列標(biāo)簽位點（STS），擴增產(chǎn)物用電泳或雜交等方法進(jìn)行檢測。
PCR擴增后檢測方法
PCR擴增產(chǎn)物最常見的檢測方法是瓊脂糖凝膠電泳，本指南也予以推薦。由于每個泳道有5條擴增產(chǎn)物，若其分子量相差太小，電泳時間將延長至幾個小時甚至過夜。為了提高效率，選擇引物時注意各產(chǎn)物條帶之間的長度差別是否足夠大，電泳時間控制在1時以內(nèi)比較合適。
PCR產(chǎn)物經(jīng)毛細(xì)管電泳方法檢測，靈敏度更高，檢測更快速，更準(zhǔn)確，易于實驗自動化。期待該方法的配套試劑能夠取代目前的傳統(tǒng)檢測方法。
Y染色體微缺失分子檢測的臨床意義
Y染色體微缺失遺傳型與表型的關(guān)系已進(jìn)行了大量研究，對臨床有非常好的指導(dǎo)意義。
AZFa、AZFb和AZFc三個區(qū)域全部缺失的患者，100％表現(xiàn)為無****癥。不可能通過任何手段從睪丸中獲得****。
AZFa區(qū)域整段缺失通常導(dǎo)致唯支持細(xì)胞綜合征（SCO綜合征），臨床表現(xiàn)為無****癥。如果診斷為整段AZFa區(qū)域缺失，若想從睪丸中獲得****進(jìn)行ICSI已不大可能。
AZFb和AZFb+c整段缺失的典型睪丸組織學(xué)特征是SCO綜合征或生精阻滯。與AZFa區(qū)域整段缺失的情況類似，這種病人在睪丸穿刺時也找不到****。因此，不推薦給這類病人施行ICSI。
AZFc缺失的臨床和睪丸組織學(xué)表型多種多樣。一般說來，AZFc缺失患者尚殘存****生成能力。AZFc缺失見于無****癥或嚴(yán)重少****癥患者，罕見情況下，也可以在自然狀態(tài)下遺傳給其男性后代。在無****癥患者中，AZFc缺失者通過TESE獲得****的機會要大得多，也可以進(jìn)行ICSI受孕。但這些患者的男性子代將是AZFc缺失的攜帶者。
另外，有研究發(fā)現(xiàn)AZFc區(qū)域缺失的少****癥患者，其****數(shù)目有進(jìn)行性下降的趨勢，最后發(fā)展為無****癥。因此，對AZFc區(qū)域缺失的少****癥患者,應(yīng)及早進(jìn)行治療或?qū)⑵?***進(jìn)行冷凍保存。 |
|
|
